檢測對象:植物總RNA的提取測定
報告樣式:電子版、書面報告,中、英文均可。
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測定周期:樣品測試周期一般為7-15個工作日。
測定費用:工程師根據檢測項目進行報價。
測定范圍
八仙花,鵝掌楸,蓮藕組織,非洲菊花瓣,石斛,南瓜,小麥葉片,棉花組織,百合花等。
測定項目:植物總RNA的提取測定
植物總RNA的提取實驗
在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。了解植物總RNA 的分離和純化方法。
取5~10 g 材料放入研缽中, 加入過量液氮, 迅速研磨成均勻的粉末(在研磨過程中, 保證材料始終浸在液氮中, 研磨約30 min) 。
待液氮自然揮發(fā)干凈后, 將材料轉入100 ml 的離心管中, 加入6 ~ 8 倍體積的裂解液1 , 輕輕攪拌后, 0 ℃ 冰浴20 min。12000 r/ min , 4 ℃離心15 min。
取上清, 加入1/ 3 體積的3 mol/ L 醋酸鈉, 1/ 5 的氯仿異戊醇, 輕輕搖勻, 0 ℃冰浴20 min。
2000 r/ min , 4 ℃離心15 min ( 加5 倍體積裂解液2 溶解沉淀以提取DNA)。
取上清, 加入等體積冰浴冷卻的異丙醇, 混勻且冰浴10 min。
5000 r/ min , 4 ℃ 離心10 min , 將沉淀溶于5 ml 含有0 . 1%SDS 的TE 緩沖液中, 加入8 mol/ L LiCl 使終濃度至2 . 5 mol/ L,冰浴3 h 或4 ℃過夜。
12000 r/ min , 4 ℃離心10 min。
70%乙醇洗滌沉淀兩次, 空氣干燥10 min , 溶于無菌水(DEPC 焦碳酸二乙酯, 處理) , 加入1/ 10 體積10% 的SDS, 重復第4~6 步驟, 進一步除去蛋白質, 70%乙醇20 ℃長期保存。
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植物總RNA的提取測定標準
T/SDAS 356—2022 金銀花RNA提取純化技術規(guī)程
植物總RNA的提取測定流程
1、寄樣(或上門取樣)
2、初檢
3、根據檢測復雜程度進行報價。
4、雙方確定,簽訂保密協議,開始檢測
5、完成檢測
6、郵寄檢測報告,提供后期服務。
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