GB5413.13-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素B6的測定內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測范圍廣泛，可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測標(biāo)準(zhǔn)及項目安排檢測，全國近千家合作實驗室，CMA/CNAS資質(zhì)齊全，可就近安排寄樣檢測。今天百檢網(wǎng)就給大家簡單介紹一下GB5413.13-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素B6的測定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。

1.范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中維生素B6的測定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中維生素B6的測定。

2.規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

3.原理

試樣經(jīng)熱水提取等前處理后,經(jīng)C18色譜柱分離,熒光檢測器檢測,外標(biāo)法定量測定維生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)的含量。

4.試劑和材料

除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的一級水。

4.1 淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。

4.2 辛烷磺酸鈉:優(yōu)級純。

4.3 冰乙酸:優(yōu)級純。

4.4 甲醇:色譜純。

4.5 三乙胺:色譜純。

4.6 鹽酸溶液(5.0mol/L,0.1mol/L)。

4.7 氫氧化鈉溶液(5.0mol/L,0.1mol/L)

4.8 標(biāo)準(zhǔn)溶液

4.8.1 維生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)標(biāo)準(zhǔn)貯備液(1mg/mL):稱取0.05g(*至0.0001g)吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺標(biāo)準(zhǔn)品,分別置于50mL容量瓶中,用水溶解定容。

4.8.2 維生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(20μg/mL):分別準(zhǔn)確吸取吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液(4.8.1)1mL至50mL容量瓶中,用水定容。

4.8.3 維生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)混合標(biāo)準(zhǔn)系列測定液:分別準(zhǔn)確吸取維生素B6。混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(4.8.2)0.0mL、1.0mL、2.0mL、30mL、50mL,至100mL容量瓶中,用水定容。該標(biāo)準(zhǔn)系列濃度分別為0.00μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.60μg/mL、1.00μg/mL。臨用前配制。

5.儀器和設(shè)備

5.1 超聲波振蕩器。

5.2 高效液相色譜儀,帶熒光檢測器。

5.3 天平:感量為0.1mg。

5.4 pH計:精度為0.01。

5.5 培養(yǎng)箱:30℃～80℃。

6.分析步驟

6.1 試樣預(yù)處理

6.1.1 含淀粉的試樣:稱取混合均勻固體試樣約5.0g(*至0.0001g),加入約25mL45℃～50℃的水,或稱取混合均勻液體試樣約20.0g(*至0.0001g)于150mL錐形瓶中。加入約0.5g淀粉酶(4.1),混勻后向錐形瓶中充氮,蓋上瓶塞,置50℃～60℃培養(yǎng)箱內(nèi)約30min。取岀冷卻至室溫。

6.1.2 不含淀粉的試樣:稱取混合均勻固體試樣約5.0g(*至0.0001g),加入約25mL45℃～50℃的水,或稱取混合均勻液體試樣約20.0g(*至.0001g)于150mL錐形瓶中。混勻并充分溶解,靜置5min～10min,冷卻至室溫。

6.2 待測液的制備

6.2.1 用鹽酸溶液(4.6)調(diào)節(jié)試樣溶液的pH值至1.7±0.1,放置約1min。再用氫氧化鈉溶液(4.7)調(diào)節(jié)試樣溶液的pH值至4.5±0.1。

6.2.2 將試樣溶液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,用水沖洗錐形瓶。洗液合并于50mL容量瓶中,用水定容至50mL。

6.2.3 把上述容量瓶放入超聲波振蕩器中,超聲振蕩約10min。

6.2.4 另取50mL三角瓶,上面放入三角漏斗和濾紙,把超聲波振蕩的試樣溶液倒入其中,自然過濾。濾液再經(jīng)0.45μm微孔濾膜加壓過濾,用試管收集,即為試樣待測液。

6.3 參考色譜條件

色譜柱:C18柱(粒徑5μm,150mm×4.6mm)或同等性能的色譜柱。

流動相:甲醇(4.4)50mL,辛烷磺酸鈉(4.2)2.0g,三乙胺(4.5)2.5mL,用水溶解并定容到1000mL后,用冰乙酸(4.3)調(diào)pH至3.0±0.1,再經(jīng)0.45μm微孔濾膜加壓過濾。

流速:1.0mL/min。

檢測波長:激發(fā)波長293nm,發(fā)射波長395nm。

進(jìn)樣量:10μL。

6.4 定量分析

6.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

將維生素B6混合標(biāo)準(zhǔn)系列測定液(4.8.3)依次進(jìn)行色譜測定(其標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖參見附錄A中圖A.1)。記錄各組分的色譜峰面積或峰髙,以峰面積或峰髙為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)測定液的濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

6.4.2 試樣測定

將試樣待測液(6.2.4)進(jìn)行色譜測定。記錄各組分色譜峰面積或峰髙,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算岀試樣待測液中維生素B6各組分的濃度ci。

7 分析結(jié)果的表述

7.1 試樣中維生素B各組分的含量的計算

試樣中維生素B6各組分的含量按式(1)計算：

…………

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